espectrometría de masas con láser de dos pasos para una investigación celular más precisa
espectrometría de masas con láser de dos pasos para una investigación celular más precisa
Se informa que con el fin de mejorar la espectrometría de masas para mejorar el estudio de la composición citoquímica, investigadores de la Universidad de Münster han desarrollado un método para mejorar la resolución espacial de la espectrometría de masas de ionización por desorción láser asistida por matriz (MALDI) en las agencias de salud del Reino Unido. Aumentado en aproximadamente una milésima de milímetro.
Los investigadores llamaron a la técnica t-MALDI-2 ('t' indica el modo de transmisión), que utiliza dos láseres: uno para generar un enfoque más pequeño en el material eliminado y el otro láser que se utiliza para generar la mejora de señal necesaria. Para muchas biomoléculas, la señal se ve reforzada por varios órdenes de magnitud, como las vitaminas liposolubles, incluidas la vitamina D y el colesterol, y la administración de medicamentos. Su distribución precisa en células y tejidos, así como otra información, ayuda a comprender mejor la enfermedad y los procesos inflamatorios y muestra nuevas estrategias para tratarlos.
La espectrometría de masas MALDI define la naturaleza y la composición de una molécula en función de su masa característica: su "peso molecular". De esta manera, es posible tomar muestras de la muestra irradiada con láser, por ejemplo, una sección de tejido delgado obtenida de una biopsia, que puede definir docenas o incluso cientos de biomoléculas diferentes simultáneamente en una medición. Sin embargo, hasta la fecha, la espectrometría de masas proporciona una resolución mucho más baja que los microscopios ópticos clásicos. La introducción de la nueva tecnología t-MALDI-2 reducirá en gran medida esta brecha.
El Dr. Marcel Niehaus, uno de los dos autores principales del estudio, explicó: "Las mejoras decisivas proporcionadas por nuestro enfoque se basan en la combinación y extensión de las dos técnicas utilizadas anteriormente en comparación con el enfoque de imagen MALDI establecido. En la geometría de transmisión, hemos irradiado la muestra en la dirección opuesta. De esta manera, podemos colocar la lente del microscopio de alta calidad muy cerca de la muestra, reduciendo así el tamaño del punto láser. Por razones geométricas, este método es diferente del método estándar de iluminar una muestra desde la dirección del analizador de masas".
Sin embargo, en las pequeñas regiones de la muestra eliminadas por el láser, solo se dispone de una cantidad muy pequeña de material para las mediciones posteriores de espectrometría de masas. Por lo tanto, el segundo paso decisivo es utilizar un método llamado MALDI-2, que los investigadores han introducido en Science en 2015. El efecto es el llamado láser postionización, que hace que las moléculas más no cargadas se transfieran más a la forma iónica. Si las moléculas tienen una carga positiva o negativa, son visibles para el analizador de masas.
En sus últimas investigaciones utilizando la estructura fina del cerebelo de ratón y el uso de cultivo de células renales, los investigadores demostraron las posibilidades que ofrece su tecnología. Klaus Dreisewerd, profesor de instituciones de salud en el Reino Unido y uno de los líderes de la investigación, dijo: "Nuestro enfoque puede mejorar la comprensión de las personas de muchas actividades in vivo desde el nivel molecular. Además, los métodos desarrollados por microscopía óptica, como la microscopía de fluorescencia, se pueden utilizar con imágenes de espectrometría de masas en instrumentos 'multimodo' que se utilizan en conjunto".
Se informa que con el fin de mejorar la espectrometría de masas para mejorar el estudio de la composición citoquímica, investigadores de la Universidad de Münster han desarrollado un método para mejorar la resolución espacial de la espectrometría de masas de ionización por desorción láser asistida por matriz (MALDI) en las agencias de salud del Reino Unido. Aumentado en aproximadamente una milésima de milímetro.
Los investigadores llamaron a la técnica t-MALDI-2 ('t' indica el modo de transmisión), que utiliza dos láseres: uno para generar un enfoque más pequeño en el material eliminado y el otro láser que se utiliza para generar la mejora de señal necesaria. Para muchas biomoléculas, la señal se ve reforzada por varios órdenes de magnitud, como las vitaminas liposolubles, incluidas la vitamina D y el colesterol, y la administración de medicamentos. Su distribución precisa en células y tejidos, así como otra información, ayuda a comprender mejor la enfermedad y los procesos inflamatorios y muestra nuevas estrategias para tratarlos.
La espectrometría de masas MALDI define la naturaleza y la composición de una molécula en función de su masa característica: su "peso molecular". De esta manera, es posible tomar muestras de la muestra irradiada con láser, por ejemplo, una sección de tejido delgado obtenida de una biopsia, que puede definir docenas o incluso cientos de biomoléculas diferentes simultáneamente en una medición. Sin embargo, hasta la fecha, la espectrometría de masas proporciona una resolución mucho más baja que los microscopios ópticos clásicos. La introducción de la nueva tecnología t-MALDI-2 reducirá en gran medida esta brecha.
El Dr. Marcel Niehaus, uno de los dos autores principales del estudio, explicó: "Las mejoras decisivas proporcionadas por nuestro enfoque se basan en la combinación y extensión de las dos técnicas utilizadas anteriormente en comparación con el enfoque de imagen MALDI establecido. En la geometría de transmisión, hemos irradiado la muestra en la dirección opuesta. De esta manera, podemos colocar la lente del microscopio de alta calidad muy cerca de la muestra, reduciendo así el tamaño del punto láser. Por razones geométricas, este método es diferente del método estándar de iluminar una muestra desde la dirección del analizador de masas".
Sin embargo, en las pequeñas regiones de la muestra eliminadas por el láser, solo se dispone de una cantidad muy pequeña de material para las mediciones posteriores de espectrometría de masas. Por lo tanto, el segundo paso decisivo es utilizar un método llamado MALDI-2, que los investigadores han introducido en Science en 2015. El efecto es el llamado láser postionización, que hace que las moléculas más no cargadas se transfieran más a la forma iónica. Si las moléculas tienen una carga positiva o negativa, son visibles para el analizador de masas.
En sus últimas investigaciones utilizando la estructura fina del cerebelo de ratón y el uso de cultivo de células renales, los investigadores demostraron las posibilidades que ofrece su tecnología. Klaus Dreisewerd, profesor de instituciones de salud en el Reino Unido y uno de los líderes de la investigación, dijo: "Nuestro enfoque puede mejorar la comprensión de las personas de muchas actividades in vivo desde el nivel molecular. Además, los métodos desarrollados por microscopía óptica, como la microscopía de fluorescencia, se pueden utilizar con imágenes de espectrometría de masas en instrumentos 'multimodo' que se utilizan en conjunto".